肌萎缩侧索硬化患者脑脊液对间充质干细胞增殖分化的影响
目的 观察肌萎缩侧索硬化患者脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖分化的影响,探讨MSCs经CSF内移植治疗肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)的启动机制.方法 通过密度梯度离心联合贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,取生长状态良好的第3代细胞,按0.5×105 cells/ 孔的浓度接种于24孔培养板中,分别加入ALS患者CSF、病例对照组CSF以及和等量条件培养液(空白对照)共培养7 d.MTT法分别检测共培养1 d、4 d、7 d后的MSCs增殖能力,免疫荧光法检测神经细胞特异性表面标志物巢蛋白(Nestin)和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)的表达水平.结果 (1)MSCs共培养1 d后,各组细胞形态学无明显变化;4 d后,ALS患者组部分细胞开始收缩并出现细胞突起等形态学变化,病例对照组可见少量细胞出现细胞突起等形态学变化,空白对照组细胞仍无明显形态学变化;7 d后ALS患者组及病例对照组突起细胞数较前明显增多,空白对照组仅可见少量突起细胞;(2)ALS患者组及病例对照组1、4、7 d的细胞平均吸光度值(A)明显高于空白对照组(P＜0.01),但ALS患者组及病例对照组无明显差异(P>0.05);(3)MSCs共培养7 d后,ALS患者组和病例对照组Nestin、NSE染色均有阳性细胞表达,而空白对照组仅有极少量表达;ALS患者组Nestin及NSE染色阳性率均显著高于病例对照组(P＜0.05).结论 MSCs分化需要一定的微环境,ALS患者CSF能诱导其分化成为神经元样细胞,可能在MSCs定向分化和神经组织修复机制的启动环节中起作用.
肌萎缩侧索硬化、骨髓间充质干细胞、干细胞移植、微环境
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R746.4(神经病学与精神病学)
湖北省卫生厅青年人才基金QJX2008-38
2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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