胎鼠皮质神经元细胞核的制备和鉴定

摘要：

目的 建立制备皮质神经元细胞核的方法,以便用于核移植研究.方法 (1)采用胎龄17 d的胎鼠进行皮质神经元的分离培养,用抗MAP2和NeuN免疫细胞化学法进行鉴定;(2)用梯度离心法制备神经元细胞核,并用HE染色、免疫荧光染色、透射电镜检查等方法进行鉴定,用台盼蓝染色检测其活性.结果 (1)胎鼠皮质神经元呈多角形,伸出多个突起,MAP2染色显示神经元细胞浆和突起呈免疫反应阳性,NeuN染色显示神经元细胞核呈免疫反应阳性,部分核周胞质和部分近端突起也呈免疫反应阳性,MAP2和NeuN阳性细胞比例均在90%左右;(2)HE染色和Hoechst33342免疫荧光染色显示神经元梯度离心后在22%～30%Ficoll400梯度层可见到大量圆点状细胞核,台盼蓝染色显示活细胞核比例为99.6%;在22%～30%Ficoll400梯度层细胞透射电镜标本中可观察到圆形的细胞核,在细胞核的周围仅见到一层薄薄的胞浆成分.结论 梯度离心法是制备皮质神经元细胞核的可靠方法.

关键词：神经元、细胞核、核移植

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分类号：Q813;R741(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目30270490;重庆市科技计划项目7452

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：98-102