益气除痰方下调vimentin表达与逆转EMT相关性研究
目的：观察益气除痰方肺癌肿瘤生长、肺转移的影响，并通过差异蛋白组学技术筛选出差异表达蛋白vimentin，并结合相关技术分析其可能的意义。方法：C57 BL小鼠40只，接种Lewis肺癌细胞，造模第2天，随机分为对照组（生理盐水）和低、中、高剂量观察组予益气除痰方1．0g· kg -1· d -1，3．0g· kg -1· d -1，9．0g· kg -1· d -1，每组10只，灌胃21d后，检测肿瘤体积、重量、肺转移灶，分别提取最佳剂量治疗组和模型组肿瘤组织的总蛋白，应用双向荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）系统获得蛋白点表达差异信息，运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（ MALDI-TOF-TOF ）鉴定出差异蛋白质。并以荧光定量 PCR 和 Western blot 法对差异蛋白进行表达差异鉴定。培养A549细胞，20％益气除痰方含药血清干预，划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变，RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP-1、MMP2、MMP9、MMP14 mRNA基因表达的影响。结果：益气除痰方3．0 g · kg -1· d -1治疗组肿瘤体积、瘤重、肺转移灶数均明显小于LEWIS模型组（ P＜0．01），肿瘤抑制率为57．21％。蛋白质组学研究鉴定受益气除痰方调控影响的蛋白37个，其中vimentin下调尤其明显。20％益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力，并能降低MMP2、MMP14mRNA基因的表达，与空白组比较差异有显著性（ P＜0．01）。结论：益气除痰方明显下调vimentin表达，抑制A549细胞的运动能力，减少基质金属蛋白酶MMP2、MMP14的分泌，这可能与益气除痰方逆转肺癌细胞上皮-间质转化有关，值得进一步研究。
益气除痰方、LEWIS肺癌、上皮-间质转化
R73;R76
国家自然科学基金资助项目30772862
2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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