蘘荷根茎乙醇提取物对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响
目的:探究蓑荷根茎乙醇提取物的抗炎活性及作用机制.方法:以70％乙醇为溶剂对蘘荷根茎回流提取制得提取物,测定其总酚酸和总黄酮含量,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS)鉴定其化学成分;MTT法测定蘘荷根茎乙醇提取物对RAW264.7细胞和L929细胞存活率的影响;用脂多糖(LPS)对RAW264.7细胞进行诱导建立体外炎症模型,通过NO检测试剂盒、ROS检测试剂盒、ELISA、免疫印迹法检测其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核转录因子κB(NF-κB)信号通路中一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放量、活性氧(ROS)水平及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探究蘘荷根茎乙醇提取物的抗炎作用及可能的作用机理.结果:蘘荷根茎乙醇提取物富含酚类成分[(15.07±0.13)mg GAE/g],鉴定出酚类化合物为L-酪氨酸、原儿茶酸、原儿茶醛、4-甲基水杨酸、对羟基安息香醛、咖啡酸、香兰素、对羟基肉桂酸、白果新酸;蓑荷根茎乙醇提取物在31.3、62.5、125、250 μg/mL时对RAW264.7和L929细胞的存活率无显著影响;与空白对照组比较,模型对照组NO、IL-6、TNF-α和ROS含量显著升高(P＜0.01),iNOS表达、P38、JNK、ERK、IκBα的磷酸化表达以及细胞核NF-κB p65表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01),IκBα和细胞质NF-κB p65的表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,蘘荷根茎乙醇提取物31.3、62.5、125、250μg/mL组NO、IL-6的释放量明显降低(P＜0.05或P＜0.01);蘘荷根茎乙醇提取物62.5、125、250 μg/mL组ROS水平显著降低,iNOS表达、JNK、ERK、IκBα的磷酸化表达以及细胞核NF-κB p65表达显著下调,细胞质NF-κB p65表达显著上调(P＜0.01);蘘荷根茎乙醇提取物125、250 μg/mL组IκBα表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01);蘘荷根茎乙醇提取物250 μg/mL组TNF-α的释放量明显降低和P38的磷酸化表达明显下调(P＜0.05).结论:蓑荷根茎乙醇提取物具有良好的抗炎作用,其抗炎机制可能与抑制LPS诱导的MAPK和NF-κB通路的活化有关.
蘘荷、巨噬细胞RAW264.7、抗炎活性、丝裂原活化蛋白激酶、核转录因子κB
39
R541.4;R392.12;R735.2
贵州大学引进人才科研项目;贵州省科学技术基金资助项目
2023-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
71-77
