山楂叶黄酮通过Nrf-2/ARE信号通路对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用研究
目的:山楂叶黄酮是山楂叶中的药理活性成分,本研究探讨了山楂叶黄酮对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制.方法:通过H2O2诱导PC12细胞建立体外细胞模型,采用CCK-8法测定PC12细胞存活率,考察H2O2对PC12的细胞毒性及山楂叶黄酮对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用;采用LDH法考察山楂叶黄酮对H2O2致PC12细胞毒性的影响;采用Ho-echst 33342染色、AnnexinV-FITC/PI双染色法检测山楂叶黄酮对H2O2致PC12细胞凋亡的影响,JC-1法检测山楂叶黄酮对H2O2致PC12细胞线粒体膜电位的影响;采用探针DCFH-DA检测山楂叶黄酮对H2O2致PC12细胞内活性氧(ROS)的影响;采用超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)试剂盒检测山楂叶黄酮对H2O2致PC12细胞内氧化状态的影响;采用Western Blot法检测PC12细胞内相关凋亡蛋白BAX、BCL-2和Caspase-3的表达以及核因子红细胞2相关因子2(Nrf-2)/ARE通路相关蛋白Nrf-2、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO-1)、血红素加氧酶-1(HO-1)和Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的表达.结果:与正常对照组比较,模型对照组PC12细胞存活率显著降低(P＜0.01),细胞内ROS水平、细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),线粒体膜电位显著降低(P＜0.01),SOD和CAT活性以及GSH含量显著降低(P＜0.01),MDA含量显著升高(P＜0.01),BAX和Caspase-3蛋白表达显著上调(P＜0.05或P＜0.01),BCL-2、Nrf-2、NQO-1和HO-1蛋白表达明显下调(P＜0.05或P＜0.01).与模型对照组相比,山楂叶黄酮10 μg/mL、20 μg/mL组细胞存活率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),细胞内ROS水平、细胞凋亡明显减少(P＜0.05或P＜0.01),线粒体膜电位显著升高(P＜0.01),SOD和CAT活性以及GSH含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01),BAX和Caspase-3蛋白表达明显下调(P＜0.05或P＜0.01),Bcl-2、Nrf-2、NQO-1和HO-1蛋白表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01).结论:山楂叶黄酮通过调节Nrf-2/ARE信号通路保护PC12细胞对抗H2O2诱导的氧化应激损伤和细胞凋亡.
山楂叶黄酮;氧化应激;细胞凋亡;核因子红细胞2相关因子2/ARE信号通路
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四川省科技厅应用基础研究项目;成都中医药大学"杏林学者"学科人才科研提升计划
2021-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
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