寒证和热证动物模型的建立方法及评价
目的:建立稳定、客观的中医寒证和热证的动物模型.方法:将72只Wistar大鼠(雌雄各半),随机分为正常对照组、寒证模型组和热证模型组.寒证模型组予冰水(0℃)灌胃和冷水(10℃)泡浴,热证模型组予乙醇溶液(0.1 mg/ml~0.3 mg/ml)和辣椒素(0.2 mg/ml~0.9 mg/ml)溶液灌胃,正常对照组予生理盐水灌胃.每组均予10 ml/kg灌胃,每日1次,连续5周.每日测定大鼠体征评分(R)、饮水量及摄食量,每周检测体重,取材前1h测量大鼠肛温.造模结束后,测定大鼠大肠组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.HE染色,光镜下观察各组大鼠大肠组织学形态改变,并对病理组织学结果进行评分.结果:与正常对照组比较,寒证模型组6<R≤3时,评分显著高于正常对照组,饮水量和肛温明显降低,摄食量和体重增加.热证模型组R≥6时,评分显著高于正常对照组,饮水量和肛温上升,摄食量和体重下降.与正常对照组比较,热证模型组Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH酶和LDH酶活性明显升高;寒证模型组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SDH酶和LDH酶活性降低不明显.与热证模型组比较,寒证模型组Na+-K+-ATP酶、Ca2-Mg2+-ATP酶、SDH酶和LDH酶活性显著降低(P<0.05或P<0.01).病理组织学检查表明,寒证模型、热证模型组大肠粘膜杯状细胞排列紊乱,炎性细胞浸润.病理评分结果表明,寒证模型、热证模型组病理损伤明显高于正常对照组(P <0.05或P<0.01).结论:寒证模型通过冰水灌胃和冷水泡浴的方法建立,热证模型通过乙醇溶液和辣椒素溶液灌胃建立,模型成功模拟寒证、热证的临床症状及病理组织学变化.本实验结果为寒证、热证模型的病理生理及药理研究提供了更为准确、客观、有效的动物模型评价方法.
寒证、热证、动物模型、腺苷三磷酸酶(ATP)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)
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R714.55;R562.25;R684.1
国家自然科学基金NO.81673944
2020-06-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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