参苓白术散通过自噬调节脂多糖诱导的肠隐窝上皮细胞通透性变化
目的:探究参苓白术散通过细胞自噬调节脂多糖(LPS)诱导的肠隐窝上皮细胞(IEC-6)通透性变化研究.方法:细胞分组:空白组、LPS(100 μg/ml)模型组、LPS+参苓白术散1 g/kg含药血清5%、10%、20%剂量组、胎牛血清(FBS)组及各阻断剂组.Western blotting检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、p-Akt、p-4Ebpl、p-p70s6k、p-Ulk1及磷酸化与非磷酸化mTOR蛋白的表达量;罗丹明-鬼笔染色法检测骨架蛋白F-actin的分布;电阻仪检测细胞电阻值.结果:模型组与空白组比较,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值明显降低,信号通路蛋白mTOR、pho-mTOR、p-4Ebp1表达量上调,p-p70s6k、p-Ulk1表达下调,P-P62/P62、P-AKT/AKT比值升高.肌动蛋白丝出现紊乱、拉长,且F-actin量明显变少,TEER值明显下降;与模型组比较,参苓白术散各含药血清组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值明显升高.信号通路相关蛋白mTOR、pho-mTOR、p-4Ebp1表达明显下调,p-p70s6k、p-Ulk1蛋白表达量明显上调,P-P62/P62、P-AKT/AKT比值明显降低,F-actin排列紧密,蛋白量明显增多,TEER值明显增加.结论:参苓白术散1g/kg含药血清组能通过调控自噬相关通路促进IEC-6细胞自噬蛋白表达,同时改变IEC-6细胞骨架蛋白F-actin,减小细胞通透性,而这一过程与调控自噬相关通路PBK/AKT/mTOR有关.
参苓白术散、肠隐窝上皮细胞、脂多糖、细胞自噬、骨架蛋白、细胞通透性
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R730.2;R329.28;R563.8
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2020-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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