银杏内酯B对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

摘要：

目的:探讨银杏内酯B对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制.方法:用2mmol/L谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立模型,以不同浓度的银杏内酯B(10、50和250 μmol/L)进行保护,MTr比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色法观察药物作用后细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Fura-2/AM双波长荧光法测定细胞内钙离子浓度;Western blot检测线粒体和胞浆中CytC蛋白的表达.结果:2 mmol/L谷氨酸作用SH-SY5Y细胞24h后细胞存活率为0.721±0.013,与正常组相比明显降低;细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率为(13.27±0.08)％、细胞内钙离子浓度为359±11 nmol/L,均明显升高.与凋亡组相比,银杏内酯B(10、50、250) μmol/L保护组细胞存活率分别为0.768±0.014、0.819 ±0.013、0.897±0.010,均明显升高;细胞核核固缩裂解减少,形态有所改善;细胞凋亡率分别为11.33±0.57、7.02±0.47、5.85 ±0.24;细胞内钙离子浓度为302±9 nmol/L、243±9 nmol/L、186±8 nmol/L,均明显降低;Western blot结果显示,与凋亡组相比银杏内酯B保护组可以显著减少细胞线粒体以及胞浆中Cyt C蛋白的含量.结论:银杏内酯B对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与银杏内酯B降低了细胞内钙离子的浓度及阻断了CytC从线粒体释放入胞浆中有关.

关键词：银杏内酯B、谷氨酸、SH-SY5Y细胞、细胞凋亡、钙离子浓度、细胞色素C

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分类号：R743.3;R329.25;R965

资助基金：国家自然科学基金81171799/H1504

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：23-26