含灯盏花中成药DNA提取及其分子鉴定

摘要：

目的:优选适用于含灯盏花中成药的DNA提取方法和聚合酶链式反应(PCR)扩增引物,并通过测序和系统发育分析实现对其原料灯盏花的分子鉴定.方法:采用 4 种十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)改良方法对 3种含灯盏花的中成药进行DNA提取,测定DNA的纯度和浓度.采用内转录间隔区(ITS)、matK、psbA-trnH、rbcL位点通用引物对提取的中成药DNA进行PCR扩增,并对PCR扩增最佳位点进行测序,通过构建系统发育树进行分子鉴定.结果:4 种CTAB改良方法均能获得含灯盏花中成药DNA,其中CTAB改良方法一提取的DNA质量浓度显著高于其他改良方法;PCR扩增中以matK位点 2 对引物(matKXF/matK5R或matK3F/matK1R)最佳,可通过 1 次PCR成功获得具有单一条带且浓度较高的PCR产物,序列与灯盏花对照药材同源性为 100%,系统发育树显示可与同属其他植物区分.结论:通过CTAB改良方法一可以有效提取含灯盏花中成药样品的DNA,采用matK位点引物matKXF/matK5R或matK3F/matK1R进行 1 次PCR扩增并对产物进行测序,通过序列比对可完成其原料灯盏花的鉴定.

关键词：灯盏花、中成药、DNA提取、聚合酶链式反应扩增、分子鉴定

所属期刊栏目：25

分类号：R282(中药学)

资助基金：云南省重大科技专项202002AA100007

在线出版日期：2023-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1878-1886