烫水蛭(蚂蟥)配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

摘要：

目的:为保障临床用药的安全性和有效性,建立烫水蛭(蚂蟥)及其加工制品混伪、掺假特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法.方法:根据烫水蛭(蚂蟥)细胞色素C氧化酶Ⅰ(COⅠ)基因序列设计引物,筛选出烫水蛭(蚂蟥)的稳定引物区间;在区间内筛选获得烫水蛭(蚂蟥)的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,并设计烫水蛭(蚂蟥)特异性鉴别引物TSZ-F、TSZ-R;分别收集烫水蛭(蚂蟥)及其阴性样品,建立烫水蛭(蚂蟥)配方颗粒特异性PCR鉴别方法,并对PCR体系进行优化,对该方法的耐受性和适用性进行考察.结果:当退火温度为 54℃、循环数为 34 次,烫水蛭(蚂蟥)及其配方颗粒经PCR和凝胶电泳后,可在约 133 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带,伪品无条带.结论:建立的特异性PCR鉴别方法可准确鉴别烫水蛭(蚂蟥)饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒,也为可其中药配方颗粒的质量标准研究提供参考.

关键词：蚂蟥、烫水蛭(蚂蟥)配方颗粒、聚合酶链式反应

所属期刊栏目：25

分类号：R286(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;中国中医科学院科技创新工程项目;科学技术部科技基础资源调查专项

在线出版日期：2023-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1676-1684