基于LC-MS/MS技术同时定量分析片仔癀中特征胰酶水解肽

摘要：

目的:阐明片仔癀中的蛋白组,定量分析其中的特征胰酶水解肽,以提高片仔癀的质量控制水平.方法:优化总蛋白提取条件,采用二辛可宁酸(BCA)法测定总蛋白含量,利用鸟枪法蛋白组学表征片仔癀的蛋白组,并进一步选择含量较高、稳定性好、长度适宜的特征多肽作为目标分析物,采用在线能量分辨质谱法(online ER-MS)优化特征肽的离子对及最佳碰撞能,建立反相液相色谱-选择反应监测(RPLC-SRM)定量分析方法,测定11批片仔癀中目标多肽的含量.结果:利用UniProt数据库从片仔癀中共鉴定了来源于200个蛋白的343个肽段,以酶和骨架蛋白为主;筛选得到ALSSALHER、TLLEGEESR和VAPLGEEFR 3个特征肽,以其作为目标分析物进行定量分析,online ER-MS优化3个特征肽的定量参数离子对分别为m/z 492.3→799.4、517.3→819.4和509.3→637.3,碰撞能分别为25.0、24.4、28.6 eV.方法 学验证符合定量要求,3个多肽类成分在各批片仔癀样品中均被检出(ALSSALHER:0.06～0.44μg·g–1;TLLEGEESR:0.08～0.26μg·g–1;VAPLGEEFR:0.27～1.09μg·g–1),含量差异较小,其中特征肽VAPLGEEFR的含量较高.结论:建立的方法可靠,可为富含蛋白类成分的中药制剂的质量评价提供思路与方法.

关键词：片仔癀、酶切特征肽、定量分析、选择反应监测、在线能量分辨质谱

所属期刊栏目：25

分类号：R286(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;漳州片仔癀药业股份有限公司开放课题

在线出版日期：2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：880-887