基于巨噬细胞吞噬模型的阿胶品质生物评价方法构建

摘要：

目的:建立基于小鼠巨噬细胞系RAW 264.7吞噬模型的阿胶生物活性评价方法.方法:采用CCK-8法考察细胞密度、孵育时间以及阿胶对巨噬细胞增殖活性的影响,确定合适的阿胶给药浓度.采用高内涵结合荧光成像技术,通过考察其感染复数(multiplicity of infection,MOI,MOI=细菌数/细胞数)、给药剂量等影响因素,分析阿胶影响巨噬细胞的整体吞噬率及单个细胞吞噬指数.结果:确定最佳检测方法,即给药时间为24 h、MOI值为200倍、细菌刺激时间为2h.与Control组相比,在阿胶质量浓度为0.125 ～2.0 mg·mL-1时,可促进巨噬细胞的增殖,在0.5 mg·mL-1时阿胶促进巨噬细胞的增殖能力达到最强;在阿胶质量浓度为0.25～1.0 mg·mL-1时,对单个细胞的吞噬能力没有明显作用,但是对巨噬细胞的整体吞噬率具有剂量依赖的促进作用,并在0.25 mg· mL-时阿胶促进巨噬细胞吞噬率的能力达到最强.结论:本研究建立了以巨噬细胞吞噬绿色荧光标记的大肠杆菌(Green Fluorescent Protein-Escherichia coli,GFP-E.coli)为生物模型的高内涵荧光成像筛选技术的阿胶品质评价生物方法,可用于对不同品质阿胶的检测.

关键词：阿胶、巨噬细胞、大肠杆菌、吞噬、生物评价

所属期刊栏目：21

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家重点研发计划专项2018YFC1707000;国家中药标准化项目ZYBZH-Y-BJ-07,ZYBZH-Y-TJ-43,ZYBZH-C-HUN-21

在线出版日期：2019-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：771-776,781