基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别

摘要：

目的:基于ITS序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法.方法:收集酸枣仁及其常见混伪品理枣仁、枳棋子、紫荆子、兵豆,提取总DNA,基于ITS序列设计引物并进行PCR扩增,对扩增产物进行测序,用BioEdit分析软件进行序列比对,针对变异位点用Primer Premier 5.0设计特异性鉴别引物,进行PCR反应并考察反应条件.结果:ITS序列可以用于酸枣仁及其易混淆品种的鉴别研究,在位点特异性PCR反应条件考察中,DNA模板用量范围应为0.7 ～2.1 ng·μL-1,退火温度在59℃时特异性最佳,实验建立的方法对不同Taq酶和PCR仪具有普遍适应性.结论:研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中,酸枣仁能扩增出66 bp的条带,而其他混伪品不能扩增出条带,从而实现了酸枣仁与其混伪品的快速、准确鉴别.

关键词：酸枣仁、ITS、特异性PCR、分子鉴定

所属期刊栏目：18

分类号：R28;S85

资助基金：国家自然科学基金81303166;国家中医药管理局中医药行业专项201407003

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1566-1570