金蝉花多糖的含量组成分析及其对LPS诱导的THP-1细胞NF-κB活性的研究

摘要：

目的:阐明金蝉花多糖的糖含量及单糖组成,研究其对脂多糖(Lipopolysaccharide,以下简称LPS)诱导的THP-1细胞NF-κB的活性.方法:以金蝉花为原料药材,经脱脂干燥、水提、浓缩、透析、乙醇沉淀和真空干燥后,得到金蝉花水提粗多糖.然后经二乙氨乙基纤维素(DEAE-纤维素)阴离子交换柱纯化获得4种纯化多糖.应用紫外分光光度计、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和气相色谱(GC)方法对其中性糖含量、糖醛酸含量,相对分子质量和单糖组成进行测量分析,同时对4种纯化金蝉花多糖进行了体外细胞免疫活性测定.结果:金蝉花粗多糖的中性糖含量为48.36％,糖醛酸含量为12.39％,总多糖含量为60.75％,相对分子质量为9.3×103Da,单糖组成物质的量比分别为阿拉伯糖(Ara)∶木糖(Xyl)∶甘露糖(Man)∶半乳糖(Gal)∶葡萄糖(Glc)=0.42∶0.29∶4.14∶6.38∶6.8.4种金蝉花纯化多糖中,只有0.2 mol·L-1氯化钠(NaCl)溶液洗脱的金蝉花纯化多糖(CSTA2)在高浓度(1000μg·mL-1)时具有较强的免疫抑制作用,其对NF-κB的活化率仅为77.2％,不仅远低于阳性对照LPS组,而且比空白对照还要低.高浓度(1000 μg·mL-1)和低浓度(100μg·mL-1)的蒸馏水洗脱金蝉花纯化多糖(CSTA0)均具有较强的免疫抑制作用,且显示良好的浓度依赖性,浓度越低抑制作用越强.结论:金蝉花粗多糖主要由葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、甘露糖(Man)和少量的阿拉伯糖(Ara)和木糖(Xyl)组成.金蝉花纯化多糖对LPS诱导THP-1细胞产生的NF-κB的抑制作用随着质量浓度的升高和(或)洗脱剂种类和浓度的不同会发生明显变化,高浓度(1 000 μg·mL-1)的0.2 mol· L-NaC1溶液洗脱金蝉花纯化多糖(CSTA2)和低浓度(100 μg· mL-1)的蒸馏水洗脱金蝉花纯化多糖(CSTA0)具有较强的免疫抑制作用,具有较高的肿瘤抑制活性,具有深入研究的价值.

关键词：金蝉花、多糖、分离纯化、单糖组成、NF-κB

所属期刊栏目：18

分类号：R28;R92

资助基金：武汉市科技攻关项目2013060602010263

在线出版日期：2017-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1129-1134