鳖甲煎丸对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响
目的 通过研究鳖甲煎丸药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及诱导其凋亡的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的可能作用机制.方法 Wistar大鼠40只,系统随机抽样(抓阄法)分为阴性对照组(NC组)、阳性药对照组(P组)、鳖甲煎丸高(H)、中(M)、低(L)剂量组,每组8只.L、M、H剂量组分别按21.87、43.75、87.50 mg/mL灌服鳖甲煎丸混悬液.P组灌胃0.01 mg/mL秋水仙碱溶液,NC组灌予等量的生理盐水.每只大鼠每次灌胃2mL,每日2次.每次灌胃间隔12h,连续灌胃7次,制备药物血清.将HSC-T6分为药物血清组(H/M/L/NC组)、秋水仙碱对照组(P组)及空白对照组(BC组),H、M、L、NC及P组给予对应药物血清进行培养,BC组为不合药物血清的培养基.采用CCK8法检测HSC-T6细胞24、48、72 h时增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blot法检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平.结果 与NC组比较,M、H、P组24 h细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05);48、72 h时与NC组比较,L、M、H、P组细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05).但24、48、72 h各时间点之间L、M、H、P组细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05).与NC组、BC组比较,M、H、P组的HSC-T6早期凋亡与晚期凋亡率明显升高(P<0.05),M、H、P组G0/G1期细胞数明显增多(P<0.05),L、M、H、P组S期与G2/M期细胞数明显减少(P<0.05).各组间Bcl-2蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).与NC组比较,P、H、M、L组的Bax蛋白表达明显升高(P<0.01).结论 鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制可能与其抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡有关.
肝星状细胞、鳖甲煎丸、细胞增殖、细胞凋亡、B细胞淋巴瘤-2、Bcl-2相关X蛋白
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R737.9;R2;R9
国家自然科学基金;广东省中医药局项目
2016-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
960-966