益气补肾实验方对自然流产模型小鼠foxp3、STAT5、NF-κB mRNA表达的影响
目的 观察益气补肾实验方对自然流产模型小鼠脾脏CD4+ CD25+ Treg细胞中foxp3 mRNA表达及蜕膜组织foxp3、STAT5、NF-κB mRNA表达的影响.方法 将雌性CBA/J与雄性DBA/2或雄性BALB/c小鼠以2:1合笼交配,制备自然流产模型.将CBA/J孕鼠分为5组:阴性对照组、阳性对照组、中药高剂量治疗组、中药中剂量治疗组、中药低剂量治疗组,每组10只;阴性对照组于妊娠第0天至处死日每天以10 mg/kg的剂量灌服生理盐水1次;阳性对照组于妊娠第4天以10 mg/kg的剂量单次灌服环孢素A溶液;中药高、中、低剂量治疗组于妊娠第0天至处死日每日分别按48、24、12 g/kg的剂量灌服益气补肾实验方1次.将孕鼠于妊娠第9、14天处死,取新鲜脾脏用于提取Treg细胞,并取孕鼠蜕膜组织-80℃冻存.采用磁珠分选的方法分离和纯化脾脏CD4+ CD25+细胞,采用流式细胞术鉴定分选前后CD4+ CD25+的纯度,运用RTPCR分析CD4+ CD25+细胞中foxp3 mRNA的表达情况;运用RT-PCR分析蜕膜组织中foxp3、STAT5A、STAT5B、NF-κB mRNA的表达情况.结果 CD4+ CD25+ Treg的纯度可达到88％以上,经台盼蓝检测其活性大于95％.纯化分离前CD4+ CD25 +/CD4+平均为13.20％;纯化分离后CD4+ CD25+/CD4+平均为91.43％.与阴性对照组比较,阳性对照组、中药高剂量治疗组Treg细胞中foxp3 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05);中药高剂量治疗组较中、低剂量组小鼠脾脏Treg中foxp3 mRNA表达升高(P＜0.05).与阴性对照组比较,阳性对照组、中药高、中剂量组9、14天蜕膜组织foxp3、STAT5B mRNA表达升高(P＜0.05);阳性对照组、中药高剂量组9、14天及中药中剂量组蜕膜组织STAT5A mRNA表达升高(P＜0.05,P＜0.01);阳性对照组及中药各剂量组蜕膜组织NF-κB mRNA表达降低(P＜0.01).结论 益气补肾实验方可上调自然流产模型小鼠脾脏CD4+ CD25+T细胞foxp3 mRNA及蜕膜组织中foxp3、STAT5 mRNA表达,下调母胎界面组织中NF-κB mRNA的表达,促进妊娠免疫耐受状态的维持.
自然流产模型、转录因子foxp3、转录信号转导子与激活子5、核转录因子-κB、益气补肾实验方
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R714.21;R392.11;R5
浙江省中医药重点研究项目No.2012ZZ004
2016-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
946-952
