温莪术对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响
目的 探讨温莪术对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞转分化(epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT)拮抗作用.方法 将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组:正常对照组(C组)、TGF-β1诱导模型组(T组)、温莪术低浓度组(E1组)、温莪术中浓度组(E2组)、温莪术高浓度组(E3组)、盐酸贝那普利组(Y组),除C组外,各组TGF-β1诱导24 h后,温莪术各剂量组及Y组加入药物作用48 h.运用倒置显微镜观察细胞形态的改变,细胞免疫荧光法、RT-PCR法及ELISA法检测各组NRK-52E细胞EMT过程中细胞骨架成分β-肌动蛋白(β-actin)的分布,α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA、E钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)mRNA表达,纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)浓度.结果 TGF-β1诱导3天后,T组细胞出现肥大、拉长,呈梭形,细胞骨架结构β-actin表达增多(P <0.05),胞浆内出现束状纤维样结构,细胞内α-SMA mRNA表达显著上调(P <0.05),E-cad mRNA表达降低(P <0.05),细胞上清液中FN浓度升高(P <0.05).与T组比较,E1-3组细胞仅见部分呈成纤维样改变,伴随胞浆内β-actin表达及FN浓度的降低(P <0.05),E2-3组细胞内α-SMA mRNA表达升高(P <0.05),E-cad mRNA表达减少(P <0.05),但E1组E-cad及α-SMA mRNA表达量与之比较,差异无统计学意义(P >0.05).与E1组比较,E2-3组胞浆内β-actin蛋白表达及FN浓度降低(P <0.05),E3组细胞内E-cad mRNA表达升高伴α-SMA mRNA表达降低(P <0.05).与Y组比较,E1组细胞浆内β-actin mRNA及细胞上清液中FN浓度均升高(P <0.05),E3组β-actin表达升高(P <0.05),E-cad mRNA表达降低(P <0.05),E1-3α-SMA mRNA表达量则差异无统计学意义(P >0.05).结论 温莪术可抑制TGF-β1诱导的EMT发生,可作为临床治疗慢性肾功能不全的有效药物之一.
温莪术、转化生长因子-β1、肾小管上皮细胞转分化、β-肌动蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、E钙黏蛋白
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R28;S56
浙江省中医药管理局资助项目2009ZA015
2013-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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