成都平原蚕豆高效根瘤菌的筛选及其促生功能初步评价
[目的]筛选适用于成都平原的高效广谱蚕豆根瘤菌,并对其相关促生功能进行初步评价,为成都平原高效蚕豆根瘤菌剂的研制与应用提供科学依据.[方法]供试6株根瘤菌由课题组前期分离自成都平原,其与四川主栽蚕豆'大白蚕豆'匹配良好,采用常规方法测定了这6个菌株分泌生长素及溶磷能力.菌株与蚕豆品种匹配试验采用低氮砂培法,供试蚕豆品种为成都平原主栽品种'成胡14'、'成胡15';两个品种的蚕豆种子播种后,分别接种6个菌株,以不接种为对照(CK),光照(控温22~25℃、光照强度2800 lx左右、日照时间14 h)下培养41天后收获,测定植株生物量和根瘤数.然后,对匹配性试验筛到的两株高效广谱根瘤菌进行田间验证,供试蚕豆品种为成胡15,将2个根瘤菌制备的菌剂(活菌数5.0×108 CFU/g以上,载体为泥炭)进行拌种,以不接菌处理的灭菌泥炭为对照.在盛花期(生育期105 d)采样测定株高、根瘤数、地上部分植株干重;收获期(生育期200 d)采样测产;测定两个时期植株样品氮、磷、钾含量.盛花期采用BOX-PCR分子标记法测定接种根瘤菌占瘤率,同时提取接种菌株SCAUf73、SCAUf76的总DNA,比较接种菌株及相应根瘤类菌体根瘤菌DNA的BOX-PCR分子指纹图谱.用多位点基因序列分析法对田间验证的优良菌株SCAU73进行分类地位研究.[结果]1)通过匹配性砂培试验,筛选到2株与2个成都平原主栽蚕豆品种均高效匹配的根瘤菌SCAUf73、SCAUf76.SCAUf76、SCAUf73能使'成胡14'、'成胡15'植株干重较CK显著增加40.5%~61.6%.2)通过两株菌田间接种试验发现,接种SCAUf76处理的蚕豆产量与CK差异不显著;接种SCAUf73处理蚕豆植株干重、全氮含量等指标均高于CK,籽粒鲜产比CK显著增加25.0%,并显著高于SCAUf76,其占瘤率达到33%.3)多位点基因序列分析表明,SCAUf73可能是Rhizobium的一个新类群.4)促生性试验表明,6株菌都能分泌生长素(IAA),最大分泌量为21.0 mg/L(SCAUf76);供试菌株的溶磷能力不明显.[结论]从成都平原上筛选的6个菌株中,SCAUf73具有分泌IAA能力,与蚕豆接种后,占瘤率达33%,可显著促进蚕豆氮素吸收积累,提高蚕豆籽粒产量.与成都平原的主栽蚕豆品种匹配的高效广谱根瘤菌SCAUf73,适用于成都平原的蚕豆生产.
蚕豆、根瘤菌、共生匹配性、促生性、多位点基因序列分析
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国家重点研发计划项目2016YFD0300300
2019-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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