紫花苜蓿F-box蛋白基因MsFTL的克隆及功能分析

摘要：

FTL(F-box Triple LRR protein)是F-box蛋白家族的成员,具有F-box保守结构域,在植物抵御逆境胁迫过程中起重要作用.本研究参考低温胁迫下紫花苜蓿转录组数据设计引物,通过RT-PCR克隆获得紫花苜蓿MsFTL基因,该基因的全长1422 bp,编码473个氨基酸.该蛋白含有1个F-box结构域及3个LRR重复.系统进化分析表明,MsFTL与蒺藜苜蓿XP_003626345.1 F-box/FBD/LRR-repeat protein亲缘关系最近.两者蛋白序列比对发现共有11个差异位点.在低温、盐、干旱以及外源ABA处理下,MsFTL基因受到诱导,表达量上调.构建植物过表达载体pCBM-MsFTL,通过农杆菌介导法转化烟草.对经过抗性筛选、PCR和Real-time PCR验证的转基因植株进行低温抗性鉴定.在-4℃低温胁迫下,野生型烟草叶片出现了明显的萎蔫失水现象,而转基因烟草萎蔫程度相对较轻.生理检测结果表明,4 ℃处理24h之后,转基因烟草的可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、SOD活性,CAT活性高于野生型,MDA含量低于野生型.本研究表明,MsFTL基因在提高植物对低温胁迫的抗性方面具有重要的作用.

关键词：紫花苜蓿、MsFTL基因、低温、基因克隆、功能分析

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资助基金：国家自然科学基金31770575,31470571;国家高技术研究发展计划项目2013AA102607;黑龙江省重大攻关目GA18B104;国家转基因生物新品种培育重大专项2016ZX08004-002

在线出版日期：2019-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：750-759