甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析

摘要：

MOC1属于植物特有的GRAS家族蛋白基因,是调控植物腋芽形成发育的关键基因.启动子对基因转录效率起直接调控作用,其功能分析可以精确定位基因的表达部位、发育阶段和调控机制,克隆甘蔗腋芽形成发育关键基因ScMOC1的启动子序列,研究其功能对该基因表达调控机制具有重要意义.本研究以我国主栽甘蔗品种新台糖22号(ROC22)的基因组DNA为模板,通过基因组步移和巢式PCR技术克隆到ScMOC1起始密码子ATG上游1874 bp的启动子序列.PlantCARE在线分析预测表明,该序列包含多个真核生物启动子必需的核心元件TATA-box、CAAT-box以及与光响应、激素响应和分生组织表达等相关的顺式作用元件,推测ScMOC1启动子可通过激素诱导调控ScMOC1表达,且该启动子可能通过分生组织表达顺式调控元件CAT-box参与ScMOC1对甘蔗分蘖的调控.将获得的启动子序列替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达进行活性分析,结果表明:本研究克隆的启动子片段能驱动GUS基因在甘蔗嫩叶中瞬时表达.5'缺失分析表明该启动子的基础启动子序列在起始密码子ATG上游350500 bp之间.该结果为后续ScMOC1的调控机制研究奠定了良好的基础.

关键词：甘蔗、ScMOC1启动子、克隆、瞬时表达分析

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资助基金：国家自然科学基金青年项目31601362;云南省应用基础研究计划青年项目2015FD063;云南省中青年学术技术带头人后备人才2014HB038

在线出版日期：2019-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：709-717