油茶长链脂肪酰基CoA合成酶基因1(CoLACS1)分子特征与表达分析

摘要：

长链脂肪酰基CoA合成酶(LACS)在脂肪酸的合成与分解代谢中起着重要作用.本研究以油茶(Camellia oleifera Abel)国家审定品种华硕(Camellia oleifera Huashuo)种仁转录组数据为基础,根据LACS基因Unigene序列设计引物,分离克隆了油茶LACS1基因全长cDNA序列,命名为CoLACS1(GeneBank登录号:KJ960228),全长2114 bp,开放阅读框2088 bp,编码695个氨基酸;生物信息学分析显示CoLACS1具有3个B1ock,从分子特征可判断CoLACS1属于LACS家族;氨基酸同源比对显示与其他物种的LACS氨基酸序列具有较高的相似性,其中与拟南芥LACS7相似性为78％,与麻风树、大豆、毛果杨等物种LACS6 (peroxisomal)相似性可达80％以上;对CoLACS1进行原核表达分析,构建的pET30a-CoLACS1载体成功转化至BL21(DE3)中经1 mmol/L IPTG诱导表达,菌液检测获得预测的目的蛋白(分子量约为76 kD);分析转录组数据中CoLACS1的Unigene序列RTKM值并对CoLACS1进行实时荧光定量PCR分析,结果表明CoLACS1在油茶华硕种子发育各时期平稳表达,表达丰度变化不大,荧光定量结果变化规律与转录组数据分析一致;同时分析华硕种仁不同时期含油率和脂肪酸成分变化,双变量统计分析发现CoLACS1表达模式与油茶油脂积累规律呈显著相关性.本研究为进一步研究油茶油脂积累与代谢的基因调控提供理论依据.

关键词：油茶、长链脂肪酰基CoA合成酶、基因表达、油脂积累

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资助基金：国家林业公益性行业科研专项重大项目201404702;湖南省自然科学基金项目2016JJ5031;国家自然科学基金项目31470684

在线出版日期：2017-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：139-147