金山绣线菊遗传转化体系的建立
以金山绣线菊愈伤组织为受体材料,采用组织培养的方法,在附加不同浓度TDZ的1/2MS培养基上诱导培养,获得再生植株.在附加0.03 mg·L-1TDZ的培养基上获得了92.5%不定芽的再生率,且再生芽发育良好.选择抗生素筛选试验的结果表明:金山绣线菊愈伤组织对潮霉素较为敏感,在培养基中添加浓度为5~35 mg·L-1的潮霉素均对愈伤组织分化影响较大,潮霉素浓度为5 mg·L-1时,4周时间可使外植体全部褐化死亡;在培养基中添加0~100mg·L-1的卡那霉素,不同浓度卡那霉素均对愈伤组织分化产生一定程度的影响,当卡那霉素浓度为80 mg·L-1时,愈伤组织基本不发生分化.由此确定卡那霉素为绣线菊遗传转化中适用的选择抗生素,最适选择压为80mg·L-1.抑菌抗生素的筛选试验结果表明:200mg·L-1的头孢霉素和200 mg·L-1的羧苄霉素都能有效抑制农杆茵菌株LBA4404的生长,却对金山绣线菊愈伤组织的芽分化影响不大,可确定为适宜的抑菌抗生素.利用农杆菌介导法对金山绣线菊愈伤组织进行遗传转化,得到卡那霉素抗性植株164株,并初步确定预培养1 d、菌液稀释10倍、侵染4min、共培养2d为金山绣线菊最优遗传转化体系,为金山绣线菊的基因工程育种奠定基础.
金山绣线菊、遗传转化、受体、再生体系
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S682.19(观赏园艺(花卉和观赏树木))
国家林业局”948”项目2006-4-74
2011-08-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
305-310