柴胡皂苷B通过Nrf2/ARE信号缓解Caco-2细胞氧化损伤

摘要：

目的 探讨柴胡皂苷B(saikosaponin B,SSB)对棕榈酸(palmitic acid,PA)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合诱导的人结直肠腺癌细胞(Caco-2)屏障损伤的保护作用及潜在机制.方法 利用Caco-2 细胞构建肠道屏障模型,采用随机数字表法将细胞分为对照组(CON组,n=6),模型组(PA+LPS组,n=6)和柴胡皂苷B干预组(PA+LPS+SSB组,n=6),通过测量跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值和紧密连接蛋白的表达水平,评价SSB对Caco-2 细胞屏障损伤的保护作用.通过检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)和脂质过氧化物含量评估细胞氧化压力.通过定量聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法检测SSB对Nrf2/ARE信号通路相关基因及蛋白的表达水平的影响.通过敲降Nrf2 验证SSB改善细胞屏障功能是否通过Nrf2/ARE途径.结果 PA+LPS+SSB组Caco-2 细胞的TEER值、ZO-1 和Occludin-1 的蛋白水平显著高于PA+LPS组(P<0.05).PA+LPS组细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、蛋白羰基含量(protein carbonyl content,PCC)和ROS含量均显著高于对照组(P<0.05),PA+LPS+SSB组的4-HNE、MDA、ROS含量和PCC均显著低于PA+LPS组(P<0.05).PA+LPS+SSB组细胞内Nrf2 和p-Nrf2 的蛋白水平、Nqo1 和Ho-1 的mRNA水平、过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活性均显著高于PA+LPS组(P<0.05).PA+LPS+SSBsiNrf2 组细胞中ZO-1 和Occludin-1 的蛋白水平和转录水平均显著低于PA+LPS+SSB组(P<0.05),ROS、4-HNE、MDA含量和PCC均显著高于PA+LPS+SSB组(P<0.05).结论 SSB通过激活Nrf2/ARE信号通路增加了肠上皮细胞的抗氧化能力,抑制了PA和LPS引起的Caco-2 细胞氧化应激和屏障损伤,对肠上皮细胞具有良好保护作用.

关键词：柴胡皂苷B、屏障损伤、Nrf2/ARE、氧化应激

所属期刊栏目：61

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;宁波市医学重点学科建设项目

在线出版日期：2023-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：61-67