10.3969/j.issn.1673-9701.2023.04.001
LHFPL3-AS1靶向miR-515-5p对胃癌顺铂耐药细胞增殖、迁移和侵袭的影响
目的 探讨LHFPL3-AS1靶向miR-515-5p对胃癌顺铂耐药细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时定量聚合酶链反应分析胃黏膜上皮细胞GES-1、亲本细胞HGC-27、顺铂耐药细胞HGC-27/DDP中LHFPL3-AS1和miR-515-5p 表达.将 HGC-27/DDP 细胞分为对照(Con)组、si-NC 组、si-LHFPL3-AS1 组、miR-NC 组、miR-515-5p mimic 组、si-LHFPL3-AS 1+miR-515-5p inhibitor组.双荧光素酶报告实验确定 LHFPL3-AS1 和 miR-515-5p 的靶向关系.CCK-8法检测细胞存活率,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭数,蛋白质印迹法检测E-cadherin和N-cadherin蛋白表达.结果 随着顺铂浓度的增加,HGC-27和HGC-27/DDP细胞的存活率逐渐降低,HGC-27/DDP细胞的IC50(236.20μmol/L)高于HGC-27细胞(5.83μmol/L).与GES-1细胞比较,HGC-27和HGC-27/DDP细胞中LHFPL3-AS1相对水平显著升高,miR-515-5p相对水平显著降低(P<0.05).LHFPL3-AS1 和 miR-515-5p 直接特异性结合.与 Con 组、si-NC 组比较,si-LHFPL3-AS1 组 HGC-27/DDP 细胞miR-515-5p相对水平、E-cadherin蛋白表达显著升高,克隆形成数、迁移数、侵袭数、细胞存活率、N-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-515-5p mimic组HGC-27/DDP细胞E-cadherin蛋白表达显著升高,克隆形成数、迁移数、侵袭数、细胞存活率、N-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05);与si-LHFPL3-AS1组比较,si-LHFPL3-AS1+miR-515-5p inhibitor组HGC-27/DDP细胞E-cadherin蛋白表达显著降低,克隆形成数、迁移数、侵袭数、细胞存活率、N-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05).结论 干扰LHFPL3-AS1通过上调miR-515-5p可抑制胃癌细胞HGC-27/DDP增殖、迁移和侵袭.
胃癌、LHFPL3-AS1、miR-515-5p、顺铂、耐药
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R735.2(肿瘤学)
浙江省医药卫生科技计划项目2020KY988
2023-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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