基于URP-PCR多态性片段的苦瓜枯萎病菌特异性检测技术的建立

摘要：

通过URP(Universal Rice Primers)-PCR分析尖孢镰孢菌苦瓜专化型基因组DNA扩增片段多态性,筛选检测尖孢镰孢菌苦瓜专化型的特异性引物,并建立了基于该引物的PCR检测方法.结果 表明,特异性引物为FOMM-SPF/FOMM-SPR,PCR检测体系为25μL,包括2×Green Taq Master Mix 12.5 μL,10 mmol ·L-1的上下游引物各1 μL,模板DNA 1 μL,灭菌去离子水补足至25 μL;PCR程序为95℃预变性3 min,94℃变性15 s,57℃退火30 s,72℃延伸20 s,共30个循环,循环结束后72℃延伸5 min;特异性扩增片段大小294 bp,检测灵敏度为2 ng· μL-1 DNA或50个孢子·500 mg-1土壤.该引物及其检测方法对尖孢镰孢菌苦瓜专化型的检测特异性好、灵敏度高,可以从土壤和植物样品中快速准确地检测出苦瓜枯萎病菌,无需病原菌的分离培养和致病性检测,对苦瓜枯萎病的早期诊断和预警及有效防控具有重要的指导意义.

关键词：URP-PCR多态性片段、苦瓜枯萎病、尖孢镰孢菌苦瓜专化型、分子检测

所属期刊栏目：49

分类号：S432.44;S436.42(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业农业科研专项201503110

在线出版日期：2019-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：306-313