丁香疫霉病菌PCR和实时荧光PCR检测

摘要：

为了快速、准确地检测丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY),根据GeneBank中PSY的ITS序列设计特异引物Psy1/Psy2和探针P-Psy,建立了常规PCR和实时荧光PCR检测方法.利用引物Psy1/Psy2扩增供试的26株PSY能得到585bp的预期目标条带,但扩增其它61个非PSY供试菌株不能得到预期产物,检测灵敏度为12 pg菌丝DNA;探针P-Psy 对供试26株PSY表现为阳性扩增,而对其它菌株和空白对照均表现为阴性扩增,检测灵敏度可达120fg菌丝DNA,比常规PCR高100倍;引物Psy1/Psy2和探针P-Psy对5 g土壤中PSY卵孢子的检测灵敏度分别为20 000个和200个.样品检测试验表明两种PCR方法可用于口岸植物检疫中快速、准确和特异地检测丁香疫霉病菌.

关键词：丁香疫霉病菌、检测、PCR、实时荧光PCR

所属期刊栏目：46

分类号：S432.44(病虫害及其防治)

资助基金：上海市科技兴农科技攻关计划重点项目;上海出入境检验检疫局科研项目

在线出版日期：2017-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：730-738