黄蓝状菌几丁质酶基因tfchi1的克隆、表达及抗菌活性

摘要：

为研究黄蓝状菌(Talaromyces flavus)几丁质酶性质和作用,通过RT-PCR、3′RACE及5′TAIL-PCR技术克隆了一个黄蓝状菌几丁质酶基因tfchi1,该基因全长为2561 bp,含有6个内含子,包含一个1194bp的ORF,编码397个氨基酸,分子量为43.47 kDa,属于糖苷水解酶第18家族.利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体pPIC9K/tfchi1,并转化毕赤酵母,筛选得到一株高效表达几丁质酶的工程菌GS-TFCHI1-9,甲醇诱导第7d酶活性最高,达32.29 U·mL-1.SDS-PAGE检测纯化重组蛋白的分子量约44 kDa.重组几丁质酶Tfchi1最适反应温度为35℃,最适反应pH值为5.5,在pH 6～8之间稳定.Zn2+、Cu2+对Tfchi1活性有明显的抑制作用.抑菌活性测定结果显示,Tfchi1可明显抑制敏感植物病原真菌的菌丝生长和分生孢子萌发.该酶在几丁质资源的开发利用和生物防治等领域具有较广的应用前景.

关键词：黄蓝状菌、几丁质酶、trchi1、克隆、表达、抑菌活性

所属期刊栏目：42

分类号：S432.44(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金项目310717237;转基因生物新品种培育科技重大专项2008ZX08001-002

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：146-153