鸢尾黄斑病毒几种PCR检测方法的建立和比较研究

摘要：

以带有鸢尾黄斑病毒的烟草叶片为材料,研究建立了IYSV的普通RT-PCR、免疫捕获RT-PCR和SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR方法,并比较了几种检测方法的灵敏度.结果表明,DAS-ELISA检测灵敏度较低,为1 mg带毒叶片.而各种PCR方法的灵敏度均高于DAS-ELISA 100倍以上,其中SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测灵敏度最高,可从0.4μg的带毒叶片中检出IYSV,而RT-PCR的灵敏度为40 μg带毒叶片,IC-RT-PCR的检测灵敏度是RT-PCR的4倍.鉴于DAS-ELISA灵敏度较低,建议在用ELISA初筛时,如样品OD405值与阴性对照OD405值之比在2.0左右时需要再用分子方法加以确证,以防漏检.

关键词：鸢尾黄斑病毒、PCR、检测方法、灵敏度

所属期刊栏目：42

分类号：S432(病虫害及其防治)

资助基金：国家质检总局科技项目20111K172

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：126-130