应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒

摘要：

根据柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列设计cquctv9/cquctv10特异引物对,以柑桔RNA polymeraseⅡ基因作为内参照,建立了柑桔衰退病的常规RT-PCR快速检测体系;依据柑桔衰退病毒P20基因序列设计cquctv1/cquctv2特异引物对和TaqMan探针cquctvp1,建立了柑桔衰退病荧光定量RT-PCR快速检测体系.常规RT-PCR检测下限是含有CTV的50pg总RNA,荧光定量RT-PCR法的检测下限是2 fg纯CTV片段.荧光定量RT-PCR的灵敏度相对比常规RT-PCR高100倍.利用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR体系对从2005年3月到2006年7月采自田间的样品进行检测,结果表明,2种检测体系都有很好的特异性和准确性;对183个田间柑桔苗木样品带毒率检测结果表明,荧光定量RT-PCR检出率为(82.5%),比常规RT-PCR检出率(73.2%)高.

关键词：柑桔衰退病毒、内参照、常规RT-PCR、荧光定量RT-PCR、检测

所属期刊栏目：38

分类号：S432.41;S436.661.19(病虫害及其防治)

资助基金：科技部技术创新项目05C26215111399;农业部重点科技攻关项目2004-71

在线出版日期：2008-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：24-30