10.3321/j.issn:0412-0914.2007.03.006
甘薯潜隐病毒外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备
根据已报道的甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RTPCR方法克隆了SPLV河南分离物(SPLV-HN)的CP基因及部分3'端非编码区序列,序列分析表明,SPLV-HN CP基因由879个核苷酸组成(GenBank登录号为DQ399862),编码293个氨基酸残基.与GenBank中SPLV-CH(X84011)和SPLV-T(X84012)分离物的核苷酸序列相似性分别为96.8%和93.0%;与日本分离物(E15420)的核苷酸序列相似性为83.6%.将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达.以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPLV外壳蛋白的特异性抗血清.ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测.
甘薯潜隐病毒、外壳蛋白基因、序列分析、原核表达、抗血清
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S432.41(病虫害及其防治)
河南省自然科学基金0311031500;河南省省属科研院所科研专项资金1050114
2007-07-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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