利用内标为基础的RT-PCR技术检测草莓斑驳病毒

摘要：

利用改进的CTAB法提取出优质的草莓总RNA,可以稳定地进行RT-PCR.针对草莓斑驳病毒(SMoV)基因组序列设计筛选引物,对病毒基因组的不同区域进行扩增,扩增产物经克隆、测序证明为SMoV的特异片段,与国外序列的同源性为91%～97%.为了监测RNA的质量和RT-PCR反应的正常进行,在检测体系中引入线粒体NADH脱氢酶基因ND2亚基作为内标,内标引物跨越内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增,可以较好地监测整个检测过程.在国内首次建立了SMoV的RT-PCR检测体系,以优质的草莓总RNA为模板,结合扩增内标的检测体系,对草莓病毒指示植物和草莓栽培品种都可以进行快速稳定的检测.

关键词：草莓斑驳病毒、RT-PCR、内标、检测

所属期刊栏目：35

分类号：S436.68;S668.4;S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：中国科学院资助项目30200187;国家留学回国人员科研启动基金教外司留[2002]247号

在线出版日期：2007-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：116-122