橡胶树白粉病菌分子检测技术的建立

摘要：

根据橡胶树白粉菌(Oidium heveae Steinm.)基因组中的特有保守序列OHS,设计两对特异性引物OHF1/OHR1和OHF2/OHR2.以不同地区收集的6份O.heveae(OH1～OH6)和橡胶树胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)等5种非靶标病原菌及健康橡胶树叶片基因组DNA为模板,建立了橡胶树白粉菌PCR及nested-PCR分子检测技术,并验证了检测体系的特异性和灵敏度.结果表明,引物OHF1/OHR1和OHF2/OHR2对橡胶树白粉菌均具有较高的特异性和灵敏度.其中引物OHF2/OHR2能检测到10 pg/μL的橡胶树白粉菌DNA,而以OHF1/OHR1和OHF2/OHR2组合进行nested-PCR,其最低DNA检测浓度达到0.01 fg/μL.人工接种试验中,当孢子接种量为2×103个/叶时,PCR和nested-PCR检测体系可分别在接种4d和24 h后检测到目的条带.表明nested-PCR对在叶片组织中处于潜育期的橡胶树白粉菌的检测更有效,可为橡胶树白粉菌的检测提供一种简便而准确的检测方法.

关键词：橡胶树白粉病菌、潜育期、分子检测

所属期刊栏目：42

分类号：S763.1(森林保护学)

资助基金：国家“973”计划项目2011CB111612;国家现代农业产业技术体系CARS-34-GW8;国家自然科学基金31160359;教育部博士点基金20104601110004;海南大学科研启动资金kyqd1006

在线出版日期：2016-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：119-123,146