抗草甘膦基因的克隆及在原核表达系统中的功能分析

摘要：

为了克隆抗草甘膦基因并在原核表达系统中分析其抗性水平,利用200 μmol/L草甘膦平板从草甘膦严重污染的土壤中筛选到1株抗草甘膦菌株G6PP,经电镜和16S rDNA鉴定为恶臭假单胞菌；以该菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增出5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸酯合成酶(EPSPS)基因,该基因编码440个氨基酸,亚克隆到原核表达载体pEET-28a中构建原核表达载体pET-G6;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21 (DE3)中,经IPTG诱导,表达出46 ku的融合蛋白；携带pET-G6质粒的大肠杆菌BL21 (DE3)在液体M63培养基中能耐受150 μmol/L草甘膦的抑制.本研究结果表明克隆到的G6基因具有一定的抗草甘膦活性,对抗草甘膦作物的培育具有实践意义.

关键词：抗草甘膦、16S rDNA、克隆、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q78;S482.4(基因工程（遗传工程）)

资助基金：农业部转基因生物新品种培育重大专项2011ZX08010-003;国家自然科学基金30900950

在线出版日期：2012-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：7-12