白菜型冬油菜RuBisCo蛋白亚基基因rbcL和rbcS的克隆及其在干旱胁迫下的表达
应用双向电泳结合液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析,筛选得到干旱胁迫下白菜型冬油菜与光合作用相关差异蛋白质RuBisCo小亚基.根据已发表白菜型油菜(Brassica rapa)RuBisCo亚基rbcL和rbcS保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增陇油7号的cDNA,获得rbcL和rbcS基因开放阅读框,长度分别为1095 bp和549 bp,编码364和181个氨基酸的蛋白质.生物信息学分析结果显示,rbcL与大白菜(Brassica rapa subsp.chinensis)的蛋白质同源性达到99％以上,其保守序列属于RuBisCo Large超家族,该蛋白质理论相对分子量及等电点分别为40.29 kDa和6.70,不稳定指数(instability index,II>40为不稳定蛋白质)为41.67,属于不稳定蛋白;脂融指数(aliphatic index)为83.63,平均亲水性值(grand average of hydropathicity)为-0.232,属于亲水性蛋白质;二级结构包括38.74％ α-螺旋(alpha helix)、10.99％延伸链(extended strand)及50.27％自由卷曲(random coil);三级结构具有5个不同的活性口袋.rbcS与甘蓝(Brassica oleracea)蛋白质同源性达到99％,其保守序列具有rbcS超家族和RuBisCo Small Like超家族,理论相对分子量为20.32 kDa,理论等电点为8.23,不稳定指数为33.66,属于稳定蛋白质;脂融指数为74.86,平均亲水性值为-0.142,属于亲水性蛋白质;二级结构包括16.02％ α-螺旋、28.73％的延伸链及55.25％自由卷曲;三级结构具有4个不同的活性口袋.实时荧光定量和半定量分析显示,干旱胁迫下,白菜型冬油菜叶片rbcL和rbcS基因表达量下调是光合作用下降的原因.并且,冬油菜叶片Pn下降与RuBPCase表达抑制和活性降低有关,非气孔限制是Pn下降的主要因素.
白菜型冬油菜、rbcL、rbcS、干旱胁迫
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国家自然科学基金项目31660404;国家重点基础研究发展计划项目2018YFD0100502;甘肃省高校科研成果转化培育项目2018D-13;甘肃省现代农业产业技术体系建设专项资金,国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-13;甘肃省科技重大专项项目17ZD2NA016-4
2019-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
1882-1890
