白菜型冬油菜类甜蛋白的筛选、克隆及其在低温胁迫下的表达

摘要：

类甜蛋白是一种能在低温胁迫下诱导表达,增强植物抗逆性的关键蛋白质.本研究运用双向电泳结合质谱技术,筛选低温胁迫下陇油7号叶片差异蛋白点,从中分离出与抗寒密切相关的类甜蛋白.根据已发表植物类甜蛋白基因TLP的保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增陇油7号的DNA,获得TLP基因开放阅读框,长度为732 bp,编码243个氨基酸的蛋白质.生物信息学分析显示,与甘蓝型油菜(Brassica napus)的蛋白质氨基酸序列同源性高达99.18%,该基因在进化上高度保守,其保守序列属于植物的GH69-TLP-SF超家族,TLP相对分子质量和理论等电点分别为26.02 kD和9.15.TLP含有一个信号肽,为亲水性蛋白,亚细胞定位预测其是在内质网中合成的蛋白.二级结构预测表明陇油7号的TLP是由不规则卷曲和延伸链组成的不稳定蛋白.实时荧光定量和半定量分析显示,在适当阈值的低温胁迫下TLP基因表达量上调,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用.

关键词：白菜型冬油菜、双向电泳、低温、类甜蛋白

所属期刊栏目：43

分类号：S56;S50

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-13;国家自然科学基金项目31460356, 31560397;国家重点基础研究发展计划项目973计划2015CB150206;国家农业科技成果转化项目2014G10000317;甘肃省自然科学基金项目145RJZG050;科技部油菜杂种优势利用技术与强优势杂交种创制项目2016YFD0101300;丝绸之路经济带新疆核心区农田周年覆盖高效种植模式研究与示范项目2016E02009资助. This study was supported by the China Agriculture Research SystemCARS-13;the National Natural Science Foundation of China31460356, 31560397;the National Basic Research Program of China 973 Program2015CB150206;the Natural Science Foundation of Gansu Province145RJZG050;the part of National Key Research and Development Program2016YFD0101300;the Research and Demonstration Project of High Efficient Planting Pattern in the Core Area of the Silk Road Economic Zone in Xinjiang2016E02009

在线出版日期：2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：620-628