农杆菌介导的RNAi CP基因在大豆中的转化
花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病是大豆主要病害之一,生产上常采用种植抗性品种方法来防治.本研究以RNA干扰花叶病毒衣壳蛋白(coat protein,CP)基因为表达载体,Bar基因作为筛选标记基因,成熟子叶节为外植体,采用农杆菌介导法获得了22株T0代转基因大豆生根苗,经草丁膦涂抹、Bar试纸条和PCR法鉴定,获得RNAiCP转基因植株18株;对转基因植株T1代的遗传分析表明,外源基因能够稳定遗传到下一代且符合孟德尔遗传规律;T1代Southern杂交表明,导入的干扰片段为单拷贝;花叶病毒摩擦接种表明,RNAi CP转基因大豆植株具有抗花叶病毒特性;摩擦接种后3周,DAS-ELISA检测进一步表明,RNAi CP转基因植株花叶病毒检出率仅为7.69%,而非转基因植株为100%.这表明RNAi花叶病毒CP基因可用于抗大豆花叶病毒的研究.
大豆、RNAi CP、遗传转化、大豆花叶病毒、病毒鉴定
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S56;S18
国家转基因生物新品种培育科技重大专项20112X08004-004-009;国家自然科学基金项目31071443;浙江省科技厅公益技术项目2012C32001
2013-12-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1594-1601