期刊专题

10.3724/SP.J.1006.2012.01443

棉花非冗余性EST-SSR新标记的开发及其评价

引用
利用ClustalX等软件对公共数据库现有的393 753条棉花EST序列分析,得到349 815条非冗余EST序列,借助自主开发的SSRmine软件共发掘SSR位点11 372个,分布于10 507条EST中,EST-SSR的频率是3%,平均相隔21kb出现一个SSR.在2~6 bp的重复基元中,三核苷酸和六核苷酸分别占34.1%、40.6%,二、三、四、五和六核苷酸基序分别以AG/CT、AAG/CTT、AAAT/ATTT、AAAAG/CTTTT和AAAAAG/CTTTTT的类型最多.利用去冗余的且在亚洲棉、陆地棉、海岛棉中没有被开发过的410条EST序列设计开发了200对非冗余性SSR引物,利用自主开发的SSRD软件通过SSR引物序列下载、预处理、Blastn、提取相似性分值≥81%的引物编号、提取引物冗余对、冗余引物写成一行6个步骤去除来源于自身部分同源序列以及与CMD释放的不同棉种相似性SSR引物,得到了非相似性引物,定名为CRIXXX (CRI即Cotton Research Institute).并分别选用棉花12个种的代表性材料对其中100对进行引物功效评价,包括多态信息含量(polymorphism information content,PIC)及引物通用性研究.结果显示,从自主开发的100对SSR引物筛选出56对均能在12份材料间扩增出稳定明显的条带,其中多态性引物35对,多态率占35%.引物的PIC变幅为0.097~0.888,平均为0.482;1对海岛棉EST-SSR引物在12份材料间的通用性为100%,25对亚洲棉引物通用性为81%,74对陆地棉引物通用性为80.1%.

棉花、EST-SSR标记、冗余性、多态性、通用性

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S96;TP3

国家重点基础研究发展计划项目973计划2010CB126000;中央级公益性科研院所基本科研业务专项SJB1105;国家自然科学基金项目30900911,31000729;江苏省科技支撑计划项目BE2011304;江苏省农业科技自主创新基金;江苏沿海所所长基金项目YHS201103;山西省基础研究计划项目2009021032-1

2012-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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作物学报

0496-3490

11-1809/S

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2012,38(8)

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