利用磁珠富集马铃薯BAC文库中NBS-LRR类晚疫病抗性基因

摘要：

栽培马铃薯是高度杂合的四倍体作物,利用传统的基因克隆方式进行晚疫病抗性基因分离难度很大.然而,晚疫病抗性基因具有序列保守性,属于NBS-LRR类基因.本研究中,根据晚疫病抗性基因R3a家族的序列比对结果设计R3a基因家族的保守探针,并将含有R3a基因的BAC SH23G23部分酶切成7～11kb DNA片段.通过结合保守探针的磁珠系统对上述7～11 kb DNA片段进行R3a基因分离,将磁珠富集的片段克隆到双元载体pBINPLUS上.通过阳性克隆和菌落PCR鉴定表明,含有R3a基因的克隆比率达到82.76%,相对于磁珠系统富集前,提高R3a基因比率近19倍.本研究建立了抗病基因及其同源序列的磁珠分离系统,为分离马铃薯等多倍体作物中具有保守结构的基因提供了实验基础.

关键词：马铃薯、晚疫病、抗性基因、磁珠富集

所属期刊栏目：37

分类号：S96;S91

资助基金：国家自然科学基金项目31000738;国家科技支撑计划项目2007BAD49A01;"农业部园艺作物遗传改良重点开放实验室"资助

在线出版日期：2011-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：764-771