叶绿体型转昆虫抗冻蛋白基因烟草的耐寒性

摘要：

根据已构建的大豆叶绿体表达载体pJY01,设计特异性引物,将昆虫抗冻蛋白基因MpAFP149插入此载体中构成叶绿体表达载体pJY01-MpAFP149,利用基因枪轰击法转化烟草,经壮观霉素筛选获得4株叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草株系.PCR和PCR-Southern结果显示外源基因已整合至烟草叶绿体基因组中,但同质化水平不高:RT-PCR结果也表明昆虫抗冻蛋白基因已发生了转录.将野生型烟草、叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草及核转化T1代转抗冻蛋白基因烟草(pCAMBIA1302-MpAFP149)于-1℃低温处理3 d,观察耐寒表型及测定相对电导率.结果表明,叶绿体型转基因烟草的耐寒表型优于野生型烟草,但与核转化的T1代转抗冻蛋白基因烟草无显著差异.处理3 d时,叶绿体型转基因烟草和T1代转抗冻蛋白基因烟草的电导率分别为39.2%和38.2%,而野生型烟草已达73.7%.本实验获得的异质化转叶绿体抗冻蛋白基因烟草与转核基因烟草的耐寒力无差异.

关键词：抗冻蛋白基因MpAFP149、叶绿体转化载体、烟草、耐寒性

所属期刊栏目：35

分类号：S57;S48

资助基金：国家自然科学基金项目30760056;教育部2008促进与美大地区科研合作与高层次人才培养项目资助

在线出版日期：2009-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1253-1260