烟草SKP1基因cDNA的克隆分析及原核表达

摘要：

应用DDRT-PCR法获得可被壳寡糖诱导的枯斑三生烟SKP1基因cDNA的3'端序列,通过5'RACE扩增该基因cDNA的5'端,进而扩增此基因cDNA的全长,通过同源性比较分析表明,与本塞姆氏烟草的SKP1基因同源性达81%,其cDNA全长653 bp(GenBank登录号:AY702087),其中编码区位于73～540 bp,编码一条155个氨基酸的多肽.经预测该多肽的分子量为17 527.78 Da,等电点为4.57,定位于细胞质,功能结构域分析结果显示在4～105位氨基酸有一明显的Skp1结构域,其E值为1.25e-52,因此推断该基因为枯斑三生烟的SKP1基因.将该基因编码区亚克隆到原核表达载体pET23b(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达出与预测分子量一致的蛋白.为进一步研究该基因的功能奠定了基础.

关键词：枯斑三生烟SKP1基因、克隆、序列分析、表达

所属期刊栏目：33

分类号：S5(农作物)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA625010;2002AA245131

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：693-696