10.3321/j.issn:1002-008X.2004.09.015
Spindlin 1编码的蛋白质定位于细胞核并使NIH3T3细胞发生恶性转化
研究了卵巢癌中高表达的新基因spindlin1的亚细胞定位及其对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响, 并探讨了人spindlin1基因的生物学功能. 采用脂质体转染法将构建的融合蛋白表达载体pEGFP-N1/ pEGFP-N1-spindlin1瞬时转染COS-7细胞,观察spindlin1基因的亚细胞定位;同时稳定转染NIH3T3细胞,经G418抗性筛选后,用RT-PCR筛选并鉴定表达spindlin1的稳定细胞株;通过细胞增殖活性、流式细胞检测、软琼脂克隆形成、迁移实验及裸鼠成瘤等对转染细胞的生物学行为进行检测. 结果表明,spindlin1定位于胞核;并促进NIH3T3细胞的增殖,使其处于G2/M期的细胞比例显著增加;同时证实过表达spindlin1的NIH3T3细胞不仅具明显的克隆形成及迁移能力,而且能使裸鼠成瘤. 由此我们得出结论:spindlin1基因过表达可促使NIH3T3细胞发生恶性转化,提示spindlin1可能是一种与肿瘤形成相关的原癌基因.
spindlin1、基因转染、亚细胞定位、成瘤性
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R73;R65
国家自然科学基金C03030401;首都创新工程项目248项目H020220020310;国家重点基础研究发展计划973计划2001CB509906;国家高技术研究发展计划863计划2002AA205051,2003AA205160
2004-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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