结直肠癌长链非编码RNA CASC11和原癌基因c-myc的表达及其与复发转移的关系

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）CASC11和原癌基因c-myc在结直肠癌中的表达及其与复发转移的相关性。方法:收集2016年2月至2018年7月河北省唐山市协和医院收治的90例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织标本，体外培养正常结肠上皮细胞株CCD841及结直肠癌细胞株SW480、SW620、HCT116、HT29、DLD-1。以癌组织中CASC11或c-myc mRNA相对表达量的均值为界，将患者分为CASC11或c-myc高表达者和低表达者。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）及蛋白质印迹法分别检测CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平。以CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平最高的细胞株进行后续细胞实验。分析CASC11、c-myc mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系；采用Pearson相关检验分析患者癌组织中CASC11和c-myc mRNA水平的关系。采用JASPAR软件分析CASC11与c-myc基因是否有结合位点；构建野生型、突变型CASC11重组质粒，采用双荧光素酶报告基因实验验证c-myc与CASC11间的关系。向CASC11、c-myc表达水平最高的细胞株转染载有c-myc干扰序列质粒（Sh-c-myc组）或载有其阴性对照序列质粒（Sh-NC组），另设常规培养的空白对照组（NC组）；采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞增殖情况，采用Tanswell实验检测各细胞侵袭、迁移能力，采用qRT-PCR及蛋白质印迹法分别检测各组细胞中CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较，癌组织中CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平均升高，差异均有统计学意义（均
P<0.05）；与CCD841细胞比较，各结直肠癌细胞株CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平均升高，差异均有统计学意义（均
P<0.05），其中SW480细胞株CASC11、c-myc mRNA及c-myc蛋白表达水平最高，选取其进行后续细胞实验。Pearson相关性分析结果显示，癌组织中CASC11 mRNA和c-myc mRNA表达水平呈正相关（
r=0.494，
P<0.05）。淋巴结转移者癌组织中CASC11、c-myc mRNA高表达率高于无淋巴结转移者[73.7%（28/38）比26.9%（14/52）、84.2%（32/38）比23.1%（12/52）]，TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者癌组织CASC11、c-myc mRNA高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期者[76.0%（38/50）比10.0%（4/40）、72.0%（36/50）比20.0%（8/40）]，差异均有统计学意义（均
P<0.05）。JASPAR在线软件分析显示，CASC11启动子区与c-myc基因存在结合位点；双荧光素酶报告基因实验结果显示，与共转染Sh-NC和载有野生型CASC11质粒的SW480细胞比较，共转染Sh-c-myc和载有野生型CASC11质粒的SW480细胞启动子相对活性低（
P<0.05）。与NC组、Sh-NC组比较，Sh-c-myc组SW480细胞CASC11 mRNA表达水平及侵袭、迁移细胞数低，细胞增殖抑制率高，差异均有统计学意义（均
P<0.05）。
结论:CASC11、c-myc mRNA在结直肠癌组织及细胞株中均高表达，CASC11启动子区存在与c-myc基因结合位点。二者表达具有相关性，下调c-myc可能通过抑制CASC11表达而抑制结直肠癌细胞侵袭和迁移。

关键词：结直肠癌、长链非编码RNA、复发转移、癌症易感候选基因11、原癌基因c-myc

所属期刊栏目：33

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：445-451