10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2016.01.001
Numb基因抑制细胞周期蛋白 D1表达影响人肾癌细胞 Caki-1的细胞周期和增殖
目的:研究 Numb 基因对人肾癌细胞的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法选取人肾癌 Caki-1细胞为研究对象,采用 Numb-ORF 表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测各组中 Numb 和细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)的表达,采用流式细胞术检测各组的细胞周期,采用酶标仪检测细胞在波长490 nm 处的吸光度值,评价各组细胞的增殖活力。结果实验组 PCR 扩增 Numb 的△Ct 值为1.92±0.39,阴性对照组为5.05±0.45,空白对照组为5.13±0.31;实验组蛋白质相对表达强度为6.67±0.83,阴性对照组为3.08±0.47,空白对照组为2.85±0.36,差异有统计学意义(P=0.00);实验组 cyclin D1的△Ct 值为6.20±0.87,阴性对照组为4.35±0.51,空白对照组为4.56±0.31,差异有统计学意义(P=0.02)。实验组蛋白质相对表达强度为5.85±0.72,阴性对照组为10.04±0.83,空白对照组为11.88±1.26,差异有统计学意义(P=0.00)。实验组中 G0/G1期细胞的比例为(54.29±4.15)%,高于阴性对照组的(38.69±2.60)%和空白对照组的(41.28±1.29)%,差异有统计学意义(P=0.00)。增殖实验中,实验组24 h 的吸光度值为0.67±0.07,低于阴性对照组(0.93±0.10)和空白对照组(1.02±0.06),差异有统计学意义(P=0.00)。结论 Numb 基因可以提高肾癌 Caki-1细胞 G0/G1期细胞比例,抑制细胞增殖,其机制可能是通过抑制 cyclin D1表达实现的。
肾肿瘤、基因、Numb、细胞周期蛋白 D1
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R73;R9
国家自然科学基金81100561Fund program:National Natural Science Foundation of China 81100561
2016-05-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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