重组腺病毒介导自杀基因HSV1-tk转染内皮祖细胞的实验研究

摘要：

[目的]构建含有自杀基因单纯疱疹病毒胸腺激酶基因( HSV1-tk)的重组腺病毒载体,并感染大鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPCs),以期用于抗肿瘤血管生成的基因治疗及核素报告基因显像.[方法]从大鼠骨髓中分离、培养EPCs,利用流式细胞术进行鉴定.构建重组腺病毒载体Ad5-HSV1-tk-EGFP,并感染EPCs,以腺病毒Ad5-EGFP为对照.利用RT-PCR法、Westernblot免疫印迹法检测HSV1-tk的表达,利用MTT法检测更昔洛韦(GCV)对病毒感染后EPCs的杀伤作用.[结果]流式细胞术结果显示从大鼠骨髓中分离出的EPCs阳性表达CD34(80.09％)和CD 133(81.75％),RT-PCR及Western blot免疫印迹结果显示HSV1-tk基因在转录及蛋白水平可以正确表达,MTT结果显示HSV-tk/GCV自杀基因系统对EPCs细胞具有明显的杀伤作用.[结论]重组腺病毒Ad5-HSV1-tk-EGFP感染EPCs后可以在细胞中成功表达,并且感染后自杀基因具有生物学活性,从而为利用EPCs作为载体进行肿瘤靶向基因治疗、报告基因显像提供实验依据.

关键词：肿瘤血管生成、内皮祖细胞、基因治疗、单纯疱疹病毒胸腺激酶、腺病毒、载体

所属期刊栏目：18

分类号：R730(肿瘤学)

资助基金：中国教育部博士点新教师基金20070487139;华中科技大学自主创新研究基金2011JC060

在线出版日期：2013-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：724-728