10.3971/j.issn.1000-8578.2022.22.0057
Linc00460通过海绵吸附影响miR-320a对乳腺癌细胞的有氧糖酵解作用
目的 探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌(BC)细胞有氧糖酵解作用的影响.方法 qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平.qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测miR-320a和Linc00460的靶向关系.将si-Linc00460和miR-320a inhibitor共转染至 MDA-MB-231 细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-320a表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清液中乳酸含量;酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶的活性;Western blot检测酵解途径中关键蛋白表达水平.结果 与MCF-10A细胞比较,5种BC细胞系中Linc00460高表达,而miR-320a低表达.干扰Linc00460后,MDA-MB-231细胞中miR-320a表达显著升高.双荧光素酶报告基因实验证实,miR-320a和Linc00460可靶向结合.干扰Linc00460表达后MDA-MB-231细胞增殖能力受到明显抑制(P=0.000),细胞葡萄糖摄取率和细胞上清液中乳酸含量降低(均P=0.000),PFK、PK和LDH酶活性受到抑制(均P=0.000),PFKM、GLUT1和LDHA蛋白表达水平下调(均P=0.000).抑制miR-320a可明显逆转si-Linc00460对MDA-MB-231细胞增殖和糖酵解的抑制作用(均P=0.000或0.001).结论 Linc00460可能通过海绵吸附miR-320a,上调PFKM表达,从而促进BC细胞有氧糖酵解作用.
乳腺癌、Linc00460、miR-320a、糖酵解、肌肉磷
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R737.9(肿瘤学)
2022-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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