10.3971/j.issn.1000-8578.2022.22.0188
雷帕霉素对人红白血病HEL细胞外泌体及PD-1/PD-L1 的影响
目的 探讨雷帕霉素(Rapa)对JAK2 V617F阳性HEL细胞外泌体中JAK2、ABCA3及免疫检查点PD-1/PD-L1的影响.方法 体外培养人红白血病HEL细胞(JAK2 V617F阳性),分别加入浓度为10、50和100 nmol/L的Rapa,设立对照组.CCK-8检测细胞增殖抑制率,最终确定细胞增殖抑制率选用浓度为10及50 nmol/L的Rapa干预细胞.外泌体试剂盒提取外泌体,Western blot及流式细胞术鉴定外泌体,荧光定量PCR检测外泌体中JAK2、ABCA3和PD-1、PD-L1 mRNA变化,流式细胞术检测外泌体PD-1/PD-L1蛋白表达.结果 外泌体试剂盒提取的外泌体均表达特征性的CD9、CD63、CD81蛋白,符合外泌体一般特征.HEL细胞外泌体中能够检测到JAK2 mRNA;Rapa能够减少HEL细胞外泌体产生,剂量依赖性降低外泌体中JAK2、ABCA3及PD-L1相对表达量,抑制外泌体PD-L1蛋白表达,对PD-1蛋白表达无明显影响.结论 HEL细胞可能通过外泌体传递JAK2突变基因信号,Rapa能够减少外泌体产生,进而抑制外泌体传递JAK2突变信号,抑制PD-Ll蛋白表达.
雷帕霉素、外泌体、HEL细胞、PD-1/PD-L1
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R733.7(肿瘤学)
河北省重点研发计划项目223777105D
2022-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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