pcDNA3.1-CD74-ROS1重组质粒构建与表达对肺癌细胞增殖及迁移的影响

摘要：

目的 构建C-ros致癌基因1(ROS1)融合基因CD74-ROS1重组质粒,并转染A549细胞株,检测其对肺癌细胞迁移能力的影响.方法 通过PCR技术获得CD74和ROS1基因片段,利用融合PCR法构建CD74-ROS1融合基因,构建pcDNA3.1-CD74-ROS1重组质粒,通过脂质体转染技术转入A549细胞中,利用Real-time PCR和Western blot技术检测CD74-ROS1的表达.MTT法观察细胞增殖情况,结晶紫染色法观察细胞形态变化,划痕实验检测CD74-ROS1对肺癌细胞迁移能力的影响.结果 酶切及测序结果表明CD74-ROS1融合基因构建成功,阳性克隆的CD74-ROS1蛋白表达显著增加.CD74-ROS1过表达导致细胞增殖能力增强,细胞形态上发生上皮-间质样转变且细胞迁移能力增强.结论 pcDNA3.1-CD74-ROS1重组质粒构建成功,并在A549细胞中稳定表达,CD74-ROS1过表达能够促进肺癌细胞增殖、形态转变且增强其迁移能力.

关键词：CD74-ROS1、融合PCR、非小细胞肺癌、迁移、增殖

所属期刊栏目：45

分类号：R734.2;Q786(肿瘤学)

资助基金：辽宁省科技厅联合基金项目2015020351

在线出版日期：2018-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：199-204