负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒对人肝癌细胞株增殖的影响

摘要：

目的 包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒(Ad-miR149),并检测其对人肝癌细胞株增殖的影响.方法 全基因合成microRNA-149前体核苷酸序列,插入腺病毒穿梭质粒的多克隆位点,随后与包装质粒共转染人胚肾293细胞,包装负载microRNA-149的复制缺陷型腺病毒;采用MMT方法检测Ad-miR149对人肝癌细胞株增殖的影响.结果 成功包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒,采用倍比稀释法检测病毒滴度为5× 109 pfu/ml.采用电子显微镜技术,观察到HEK293细胞中大量包装病毒颗粒.采用PCR扩增,Ad-miR149可获得腺病毒及microRNA-149特异片段,而对照Ad-LacZ只能扩增出腺病毒特异片段;采用MTT方法发现,Ad-miR149可显著抑制肝癌细胞株增殖.结论 成功包装负载人microRNA-149的复制缺陷型腺病毒并初步证实其对肝癌细胞增殖的抑制作用.

关键词：人胚肾293细胞、腺病毒、hsa-microRNA-149、微小RNAs、肝癌

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分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30900679;重庆市自然科学基金cstc2011jjA10114;重庆市医学科研计划项目2013-2-308

在线出版日期：2015-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：548-552