10.3971/j.issn.1000-8578.2013.01.010
冬凌草甲素诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其机制
目的 观察中药冬凌草的有效提取成分冬凌草甲素对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖抑制及诱导凋亡作用,并探讨其可能的抗肿瘤作用机制.方法四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察冬凌草甲素单药及冬凌草甲素联合顺铂对SKOV3细胞的增殖抑制情况;倒置显微镜和透射电子显微镜观察SKOV3细胞形态学和超微结构的改变;流式细胞术PI单染检测冬凌草甲素对细胞周期的影响;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染检测冬凌草甲素对细胞凋亡的影响;实时荧光定量聚合酶连反应(QRT-PCP)检测SKOV3细胞bcl-2、bax、survivin mRNA的表达水平.结果 (1)MTT结果显示冬凌草甲素对卵巢癌SKO V3细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间剂量依赖性,24、48、72 h的半数抑制浓度(IG50)分别为45.22、33 85、22.48 μmol/L;与顺铂合用具有协同抑制作用.(2)倒置显微镜下可见细胞生长明显受抑制.(3)透射电子显微镜结果显示,冬凌草甲素组出现空泡变性,染色质浓缩,核染色质边集.(4)细胞周期显示冬凌草甲素组细胞周期被阻滞于S期和G2/M期.(5)AnnexinV FITC/PI双染检测冬凌草甲素(10、20、30μmol/L)作用细胞48h后细胞的凋亡率分别为(9.13±0.91)%、(18.89±1.79)%、(36.11±3.01)%,明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05).(6)QRT-PCR显示冬凌草甲素组bcl-2、survivin基因表达下调,bax基因表达上调,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 冬凌草甲素对人卵巢癌SKOV3细胞具有明显的增殖抑制及诱导凋亡作用;其抗肿瘤机制可能与下调bcl-2、survivin,上调bax的表达有关.
冬凌草甲素、卵巢肿瘤、细胞凋亡、bcl-2、bax、survivin
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R737.31(肿瘤学)
2013-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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