倍半萜烯内酯诱导WEHI-3细胞凋亡的实验

摘要：

目的 探讨内质网Ca2+ -ATP酶抑制剂Thapsigargin的抗白血病作用机制.方法 利用Annexim-V/PI双染实验和琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色测定鼠白血病细胞株(WEHI-3)细胞凋亡,Fura2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),并检测在此过程中Caspase-12的表达.结果 0.5、1、2 μmol/L Thapsigargin作用于WEHI-3细胞后,分别用Annexin-V/PI双染实验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法测定WEHI-3凋亡率结果均较对照组显著升高(如Annexin-V/PI双染实验测定凋亡率分别为(25.3±3.2)％、(46.7±3.9)％、(70.2±2.3)％较对照组(7.6±0.4)％显著升高(F=26.52,P＜0.01)),且凋亡率呈剂量依赖性.Thapsigargin作用后[Ca2+]i分别为(156.5±10.3) nmol/L、( 180.3±15.6) nmol/L和(210.7±15.3) nmol/L,均较对照组(78.3±11.2) nmol/L显著升高(F=21.26,P＜0.01).Caspase-12 mRNA的表达随着Thapsigargin作用剂量增加而增加.结论 Thapsigargin通过Ca2+超载后诱发内质网应激诱导了WEHI-3细胞凋亡,Ca2+可能成为抗肿瘤药物作用新靶点.

关键词：倍半萜烯内酯、细胞凋亡、游离钙离子浓度、Caspase-12

所属期刊栏目：38

分类号：R733.7(肿瘤学)

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1389-1392